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華雅干細胞為你解答ELISA樣本值低于空白值的問題在ELISA實驗中,樣本值低于空白值是一個經(jīng)常性的問題。當樣本值較低接近試劑盒的靈敏度就容易發(fā)生樣本值低于空白值的現(xiàn)象,特別是在血清和血漿樣本的檢測。究其原因,主要在于兩個方面,一方面是誤差,另一方面是基質(zhì)效應(yīng)。下文逐個分析不同影響因素的原理、和解決方案。一、基質(zhì)效應(yīng)分析中,基質(zhì)指的是樣本中被分析物之外的組分,基質(zhì)常常對分析物的分析過程有顯著的干擾,并影響分析結(jié)果的準確性,這些影響和干擾被稱為基質(zhì)效應(yīng)。ELISA試劑盒在開發(fā)過程中,標準品不能采用人或動物血清、血漿作為標準曲線...
2015 5-27
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華雅干細胞為你解答細胞培養(yǎng)常見問題1、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)品極大的影響。來自不同特種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。2、欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細胞死亡。3、冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放放37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其...
2015 5-26
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原代細胞復(fù)蘇的基本操作方法及其常用耗材介紹一、實驗準備(1)儀器:凈化工作臺、離心機、恒溫水浴箱、倒置相差顯微鏡、培養(yǎng)箱、液氮冰箱(2)玻璃器皿:吸管(彎頭、直頭)、培養(yǎng)瓶、玻璃瓶(250ml、100ml)、廢液缸(3)塑料器皿:吸頭、槍頭、膠塞、移液管(10ml)、15ml離心管、凍存管(1~2ml)(4)其他物品:微量加樣槍、紅血球計數(shù)板、記號筆、醫(yī)用橡皮膏、移液槍(5)試劑:PBS、小牛血清、培養(yǎng)液、雙抗(青霉素、鏈霉素)、胰蛋白酶(0.08%)二、操作步驟(1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并...
2015 5-25
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臍血中分離干細胞-改良HES分離法臍帶血干細胞改良HES分離法是將傳統(tǒng)的HES分離法進行優(yōu)化和改進,在后期給予氯化銨將紅細胞液的體積縮減與分離。詳細的操作步驟如下:1.確保操作時在無菌的環(huán)境下進行,因而需要準備超凈臺對穿刺部位進行消毒;2.然后將6%的HES分別按照臍血血量的1/4加入到采集來的血袋中;3.混合均勻后使用無菌封口膠密封穿刺點,倒置與10℃的低溫環(huán)境中靜置6小時;4.分離好后先將臍血下層的紅細胞緩慢的放出,取50ml離心管置于其中,然后將血漿放入另一只50ml離心管中;5.把盛有紅細胞的離心管,...
2015 4-22
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HES分離紅細胞HES分離紅細胞HES是從支鏈淀粉衍生出來的,是富含淀粉的復(fù)合物,其生理和化學(xué)特性主要由取代級、平均分子量決定。大量實驗表明平均分子量越大對紅細胞的凝集作用越強,有效提高血細胞的沉降速度,從而使血細胞與其它細胞分離。故而,使用HES沉淀法是一種的細胞分離方法。間充質(zhì)干細胞(mesenchymalstemcells,MSCs)是指一群可向成骨細胞、成脂、肪胞、骨髓基質(zhì)細胞、肝臟細胞、心肌細胞和神經(jīng)細胞等多種細胞分化的多潛能組織干細胞,是在細胞治療、基因治療中有效發(fā)揮作用的理想工...
2015 4-22
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淺談胰酶的配制方法胰酶的配制方法Hanks液是常見的平衡鹽溶液(BSS)之一。D-Hanks液則是無鈣鎂離子的Hanks液。BSS與細胞生長狀態(tài)下的pH值、滲透壓及無菌狀態(tài)一致,且配方簡單,是組織培養(yǎng)基本用液,常用于配制培養(yǎng)基及其他用液,或洗細胞等,細胞在BSS中可生存幾個小時。胰蛋白酶(胰酸)溶液是一種常用的細胞消化液,原代培養(yǎng)時用于處理組織塊,使細胞分離下來。傳代時用胰蛋白酶使培養(yǎng)細胞離開所貼附的培養(yǎng)瓶表面,并分散成單個細胞。胰蛋白酶主要采自?;蜇i的胰臟,呈白色粉末狀,易潮解,應(yīng)在低溫干燥...
2014 10-29
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胸腺素β4在其他方面的應(yīng)用胸腺素β4在其他方面的應(yīng)用胸腺素β-4是一種胚胎在心臟發(fā)育過程中表達的蛋白,它能促進心臟細胞的遷移并影響這些細胞的生死存亡。新研究表明這種蛋白能夠在實驗誘導(dǎo)的心臟病發(fā)作后防止細胞的死亡并限制疤痕組織形成的程度。胸腺素β-4已經(jīng)被用于臨床試驗,以促進皮膚創(chuàng)傷的*。胸腺素β4(一種涉及正在發(fā)育的胚胎中細胞遷移和存活的蛋白)的活性所做的一項研究所表明的那樣。胸腺素β4增強組織培養(yǎng)物中胚胎及出生后心肌細胞的存活能力,在小鼠冠狀動脈結(jié)扎后腹膜內(nèi)注射該蛋白,能成功刺激心臟修復(fù)和激活A(yù)KT...
2014 10-28
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羊水細胞培養(yǎng)基的制備方式一、羊水細胞培養(yǎng)基常規(guī)培養(yǎng)法1、采樣:選擇妊娠13-14周婦女,在無菌條件下抽取羊水5ml,立即注入無菌離心管中。2、收集:離心分離細胞,1000rpm10分鐘,去上清,留0.5ml,輕打混勻。3、接種:將混勻的羊水細胞種置于50ml或100ml細胞培養(yǎng)瓶內(nèi),平均10ml羊水細胞收集的細胞種置一瓶加5-10ml混合培養(yǎng)液。4、培養(yǎng):酒精燈火先封口,靜置培養(yǎng)48小時后觀察細胞貼臂及生長情況,5-10天后可見瓶底面有大量羊水細胞生長。5、終止培養(yǎng):當有大量圓形發(fā)亮細胞出現(xiàn)時,加秋...
2014 9-22
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